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流式细胞检测分析技术服务-诺为生物,eBioscience,STEMCELL, SunJinLab,Lucigen,Novobiotec,Biosearch,iBiochips授权代理,干细胞,免疫学研究平台

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流式细胞检测分析技术服务

流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒(如微球,细菌,小型模式生物等)逐个进行快速定性、定量分析和分选的技术。该技术广泛的运用于从基础研究到临床实践的各个方面,涵盖了细胞生物学、免疫学、血液学、肿瘤学、药理学、遗传学及临床检验等领域。可检测培养细胞、组织样本、分离细胞等,其检测结果以直方图、二维图或假三维图表示,用于检测免疫表型分析(白血病、淋巴瘤、干细胞、疾病诊断、药物评价)、DNA含量及细胞周期分析、细胞特异性标记物、细胞凋亡研究、基因转染鉴定等方面。

流式分选可对检测到的任意感兴趣细胞群进行分选,然后进行后续实验研究(如细胞培养、Western blot、PCR、测序、染色体分析等)。

1. 提前2-3天预约。实验周期1-3天

2. 仪器参数供实验设计:

a. 3激光(405nm, 488nm, 637nm)

激光器

带通滤光片

推荐染料

488nm

530/30

FITC, Alexa Fluor 488, BB515

574/26

PEPIeYFPmCitrine Venus

695/40

Percp-eFluor710, Percp-Cy5.5, Percp, 7-AAD

780/60

PE-Cy®7QdotTM 800

637nm

660/20

APC, eFluor 660, Alexa Fluor 647

720/30

Alexa Fluor 700, APC-R700

780/60

APC-eFluor780, APC-H7, APC-Cy7

405nm

440/50

Alexa Fluor 405Pacific BlueDAPIBV421 eFluor 450

512/25

Pacific GreenAmCyanBV510 Horizon V500

603/48

Pacific Orange QdotT 605BV570BV605eFluor 605NC

710/50

Qdot 705BV650BV711

b. 2激光 (488nm, 640nm)

激光器

带通滤光片

推荐染料

488nm

530/30

FITC, Alexa Fluor 488, BB515

574/26

PEPIeYFPmCitrine Venus

695/40

Percp-eFluor710, Percp-Cy5.5, Percp, 7-AAD

780/60

PE-Cy®7QdotTM 800

637nm

660/20

APC, eFluor 660, Alexa Fluor 647

720/30

Alexa Fluor 700, APC-R700

780/60

APC-eFluor780, APC-H7, APC-Cy7

3. 服务项目包括:

a) 干细胞检测(造血干细胞、间充质干细胞、多能干细胞等);

b) DNA倍体分析、DNA含量分析、细胞周期等;

c) 细胞凋亡:Annexin V/PI 或Annexin V/7-AAD检测;

d) 细胞表面抗原分析:淋巴细胞免疫分型、白血病及淋巴瘤免疫分型、血小板相关抗体分析(CD62P\CD41a)、HLA-B27、PNH相关抗原检测(CD55/CD59)等;

e) 胞内细胞因子检测,如FoxP3、IFN等;

f) 免疫细胞及亚群分析(T/B/NK及其亚群分析);

g) Treg细胞检测;Th1/Th2/Th17/Th22细胞检测;

h) 线粒体功能、细胞氧化状态测定(ROS);

i) 其它指标:细胞内钙离子测定、耐药基因检测(p170、MRP、LRP)及凋亡基因(P53、CD95、c-erb B2、Bcl-2及Bax)等。

4. 委托方需要提供除样本、细胞数量以及抗体(可代为采购)外其它相关资料如下:

a) 详细的流式细胞实验设计,如实验目的、样品来源、处理方法等(经技术人员沟通确定);

b) 检测要求,如分选还是分析;

c) 其它与流式细胞技术相关的信息。

5. 服务流程

实验设计→样本收集及细胞处理→细胞标记→流式细胞仪分析→图像与数据处理

6. 样本及保存条件

a) 未标记细胞:细胞数1~2×10^6以上,4℃或者-80℃冻存后干冰运输;

b) 抗体标记后细胞:每管细胞数2×10^5以上,200~500μL,4℃保存运输(2小时内检测),或者多聚甲醛固定后运输(24小时内检测)。

7. 收费标准:

A. 已标记样品,直接检测待测样品方案:

检测项目收费标准

数量

价格

1)       开机50元。   具体价格请咨询客服人员(010-57438396)。


50

2)       流式细胞检测:(以上收费标准不包含抗体等试剂费用)

胞膜标记: 35元/管



胞内核内标记(如CD4, IL-17, CD8,   IFN,IL-2): 100元/管



Treg:65元/管



细胞凋亡:25元/管



细胞周期:25元/管



3)       一次送检标本数不少于10个。如果一次送检标本总数不足10个,每个测试费用为标准收费×2。低于5000元须一次性全额预付实验费,高于5000元,客户预付实验全款的70%。

注:由用户提供的样品或试剂所致的实验问题由用户负责。


×2

合计:



B.仅提供样品,检测待测样品方案:

服务项目

样品外理

应用的试剂

收费

价格

细胞周期细胞

细胞—胰酶消化—PBS洗—70%乙醇4℃固定过夜(不超过一周)

RNA酶,PI染料

<10个样品,120元/个

>10个样品,100元/个

试剂费已包括。


细胞凋亡

新鲜培养的细胞

Annexin V细胞凋亡检测试剂盒

<10个样品,150元/样品

>10个样品,120元/样品

含试剂费用,客户提供试剂可减20元,另需细胞培养费用


免疫细胞分型

培养的细胞:如白血病细胞,客户刺激好的细胞、抗凝全血、脾匀浆

破膜剂,固定剂,刺激剂、特异性抗体(需客户提供)

双染:
  <10个样品,120元/样品
  >10个样品,100元/样品

三染:在原来基础上加50元

需要分离细胞、培养、刺激的具体情况另记


表面抗原鉴定

培养的细胞

特异性抗体(需客户提供)

单染:
  <10个样品,120元/样品
  >10个样品,100元/样品

双染:在原来基础上加50元

三染:在原来基础上加50元


细胞内

钙离子检测

培养的细胞

Fluo-3 AM(钙离子荧光探针)

<10个样品,150元/样

>10个样品,120元/样品(已包含试剂)


线粒体功能

仅适用于悬浮或贴壁培养的新鲜细胞

客户提供试剂盒

检测费可同细胞周期


细胞分选



收费:标记费用+分选仪使用费用(600元/小时


合计:




8.检测报告:

A.含流式实验结果和方法实验报告单

B.提供全套检测图表、原始数据


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