干细胞研究

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  多能干细胞研究 目录

  人胚胎干细胞 hES实验方法与知识汇总

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  造血干细胞研究 目录

  造血干细胞研究工具

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  间充质干细胞研究 目录

  MSC细胞研究完整解决方案

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  血液细胞分类

  血液细胞分类和细胞生物标记

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  HSC markers

  Stem cell markers

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  小鼠造血干细胞流式分析

  小鼠造血干细胞的表面标记以及三种不同流式分选分析方法：LSK, SLAM, ESLAM。

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  小鼠造血干细胞长周期培养

  小鼠造血干细胞长周期培养系统（LTC）可以用于检测和计数原始造血祖细胞。在该培养系统中，如果提供适当的培养基、培养添加物以及适当的培养条件，原始造血细胞与粘附的基质细胞共培养则可以持续数周产生髓系克隆祖细胞和成熟粒细胞以及巨噬细胞。LTC培养系统也一直被用于淋巴细胞的产生和定量研究。

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  人CD34造血干细胞分选

  从脐带血（CB）中分选CD34+造血干细胞，有多种分选策略，本文介绍了几种常用的分选方法，以便快速获得高纯度、高活性的目的细胞。

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  造血细胞CFU集落检测，这些细节您注意到了吗？

  造血细胞CFU集落检测是目前体外检测造血干/祖细胞功能的金标准。CFU检测通常是将造血细胞以一定的密度接种于添加了适当细胞因子的半固体培养基（如：甲基纤维素半固体培养基（MethoCult™））中。相比于琼脂，在低温条件下，甲基纤维素的粘稠度更容易控制，加入的细胞因子活性更稳定，更适合于集落的形成和生长。

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  人多能干细胞冻存

  当细胞扩增到一定数量以后，建议将其冻存起来进行后续的研究。目前用的最多的冻存液为10%FBS+DMSO+培养基冻存，但是血清的存在可能会影响后期细胞的应用。本文采用无血清冻存液，分别采用团块形式和单细胞形式进行hPSC的冻存。

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  类器官研究专题汇总

  类器官这项技术自问世起，就快速且广泛的应用于多种方面，包括基础研究、转化医学和工业。类器官相关的文献也占据了各大高影响因子的期刊封面，更在2017年被Nature评为Method of the Year 2017。

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  小肠/结肠类器官

  肠上皮是一种快速更新的组织，而且每四到五天就可以进行完全的细胞替换。对于研究人员而言，这些再生特性使肠上皮成为研究上皮再生、成体干细胞生物学、疾病模型和癌症生物学的一个有吸引力的系统。

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  脑类器官

  脑类器官是源于人多能干细胞（hPSC）的三维体外培养系统，这些系统再现了发育中人类大脑的发育过程和组织。它们为人神经系统所特有的神经发育和疾病过程的研究提供了一个具生理相关性的体外模型。它们为人神经系统所特有的神经发育和疾病过程的研究提供了一个具生理相关性的体外模型。在研究人类大脑发育和神经系统疾病如自闭症、精神分裂症或由寨卡病毒感染而引起的脑缺陷，神经类器官发挥重要的作用。

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  肝脏类器官

  ​肝脏是一个重要的器官，参与广泛的过程，如解毒，蛋白质合成，代谢和激素的产生。尽管在体内具有惊人的再生能力，但是在体外，肝细胞的扩增仍然是一个挑战。肝上皮细胞作为器官的生长为研究人员提供了稳定的肝细胞群，可用于肝脏生物学、疾病建模和毒性筛选等多个领域的研究。

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  肺类器官

  最近在分离上皮祖细胞和基质细胞以及确定对肺发育重要的生态因子上取得的进展，已经导致建立了一个体外的3D肺组织培养细胞。

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  胃类器官

  胃类器官

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  胰腺类器官

  类器官是自我组织形成的三维（3D）细胞培养物，包含所代表器官的一些细胞类型和关键特征。由于维持了干细胞和祖细胞的增殖能力，上皮类器官在培养物中维持培养远远优于离体原代细胞的培养。由于它们能在体外进行有效生长并与胰腺上皮细胞直接相关，可以使用胰腺外分泌类器官来补充或替代许多胰腺研究实验方法。

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  肾脏类器官

  肾脏是中断中胚层通 过 I M来源的后肾间质和成形的输尿管芽相互作用分化而成。

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  小鼠肠类器官培养操作流程

  使用IntestiCult™类器官生长培养基（小鼠） 和Corning®Matrigel®基质进行小鼠小肠和结肠隐窝的分离、培养、传代 和冷冻保存。

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  类器官荧光染色实验流程

  类器官属于三维（3D）细胞培养物，包含其代表器官的一些关键特性。此类体外培养系统包括一个自我更新干细胞群，可分化为多个器官器官特异性的细胞类型，与对应的器官拥有类似的空间组织并能够重现对应器官的部分功能，从而提供一个高度生理相关系统.

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  iPSC来源人脑类器官培养操作流程

  STEMdiff™脑类器官试剂盒为无血清培养系统，设计用于从人胚胎干细胞（ES）和诱导多能干细胞（iPS）生成脑类器官，基于MA Lancaster和JA Knoblich8发表的配方研发。培养40天后，这些脑类器官具有层次分明的祖细胞群，并产生成熟神经元，与在早期发育中人脑皮质层的观察结果相符。

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  小鼠肝类器官培养操作流程

  HepatiCult™类器官生长培养基（货号#06030）（小鼠）是一种无血清的培养基，可以从小鼠肝脏组织快速生成肝祖细胞类器官。

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  人诱导多能干细胞鉴定

  用于鉴定干细胞的方法有多种：传统AP 染色鉴定形态、核酸方法鉴定（qPCR 检测基因表达、染色体核型分析、转座因子分析、DNA 甲基化分析），还有基于抗体的蛋白鉴定方法（如免疫荧光、免疫印迹、流式细胞术等应用）。

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  小分子大作用

  随着最近对新型嘧啶吲哚（Pyrimidoindole）类小分子-UM171(图1A）和UM729（图1B）的发现，人造血干细胞（HSCs）体外扩增的研究也在全球范围内取得了重大进展1,2。最初，在对能够促进人CD34+细胞扩增的化合物进行筛选时发现了UM729，后来对其进行了结构-活性关系（Structure-Activity Relationship，SAR）优化，进而开发出了UM1711,2。

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  如何选择合适的人胚胎干细胞培养基？

  人胚胎干细胞（hESCs）具有在体外自我更新扩增和分化为多种类型细胞的潜能，可为再生医学的替代疗法提供充足的细胞来源。

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  包被培养皿

  无滋养层无血清的培养条件下，多能干细胞的需要有特殊的基质胶促进贴壁和生长。基质胶铺的好坏对hPSC培养有很大的影响。

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  人多能干细胞冻存和复苏

  bb

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  人肠类器官培养操作流程（原代）

  肠器官培养可应用于研究肠上皮的发育和功能，模拟肠道疾病，并进行靶向小分子筛选。肠类器官培养还可用于研究成体干细胞特性和再生治疗。

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  MethoCult™ 人集落形成单位（CFU）检测 常见问题分析

  MethoCult™ 人集落形成单位（CFU）检测 常见问题分析

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  CFU集落鉴定

  CFU集落鉴定

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  CFU培养基的选择

  CFU培养基的选择

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  MethoCult™培养基的制备

  MethoCult™培养基的制备

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  细胞样本的制备

  细胞样本的制备

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  手动细胞计数

  手动细胞计数

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  CFU检测的建立

  CFU检测的建立

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  人CFU检测的计数

  人CFU检测的计数

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  人造血干细胞和祖细胞表型的鉴定

  人造血干细胞和祖细胞表型的鉴定

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  人间充质干细胞培养需要哪些培养基？

  间充质干细胞（MSCs）具有多向分化潜能、能支持造血和促进造血干细胞植入、调节免疫以及分离培养、操作简便等特点，正日益受到再生医学领域的关注。作为种子细胞, 在临床上MSCs常被用于修复组织细胞和器官损伤等多种难治性疾病；作为免疫调节细胞，治疗免疫排斥和自身免疫性疾病。

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  如何培养出高质量的MSCs

  在临床转化医学研究上，MSCs被用于治疗肝硬化、脊髓损伤、肌萎缩侧索硬化症、修复创伤组织器官、调节免疫等。

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  间充质干细胞（MSC）免疫抑制功能检测

  MSC具有调节免疫应答的能力，大大增加MSC在治疗应用中的价值。MSC可以根据微环境，通过抑制T细胞、B细胞、DC细胞、NK细胞，从而释放抑制因子、刺激因子或表达其它表面分子来发挥其免疫调节功能。研究人员还发现，无血清条件下培养的MSC比传统的含血清培养基培养的MSC对免疫细胞的免疫抑制作用更大。

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  人多能干细胞传代

  在多能干细胞培养基中生长的hPSC，当集落变得较大、中心变得密集和明亮（对比其边缘），而相邻的集落开始融合时，这时可进行细胞传代。

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  Endothelial cell markers

  Endothelial cell markers

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  肿瘤干细胞研究

  肿瘤细胞分选，肿瘤干细胞培养等

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  肿瘤类器官（PDOs）——重现患者肿瘤微环境

  构建肿瘤微环境 (tumour microenvironment, TME)是研究肿瘤异质性、癌症进展与后续转移、药物反应和耐药的理想研究模型。目前已有人源肿瘤组织来源移植瘤模型（patient-derived xenografts, PDX）和肿瘤类器官(Patients derived organoids，PDO) 两种有效的研究模型。

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  如何从PDX模型中获得高均质性肿瘤细胞?

  PDX模型人源肿瘤组织周边会混和着不同程度鼠源的间质细胞 (stroma cells) 、周细胞 (pericyte)、甚至有血管增生。这些浸润混合的鼠源” 污染细胞” 对人源肿瘤组织产生更多非必要的异质性，进而造成实验结果偏差。因此，如何有效地从异种移植肿瘤中去除小鼠细胞是PDX 模型下游分析或培养应用的重大环节。